上海酶联生物养原代细胞需要注意的细节有哪些?
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养细胞可谓是个精细活,从事养细胞的人都知道养细胞的时候一旦不注意,就很容易造成细胞污染,所以想要养好细胞除了小心谨慎以外,还要提前做好准备:
原代细胞培养前的准备
1.在带上手套开始细胞培养之前,先检查一下移液管和瓶子的数量是否充足,以免在开始实验后再次出入操作台,这样可以降低细胞污染的风险。
2.细胞培养基也应先预热,选择只预热部分培养基而非整瓶加热,不但可以节约实验时间,而且可以避免因反复加热培养基而造成的蛋白质降解。
3.结束操作后,别忘了培养基对光敏感,应尽可能避光保存。
原代细胞培养的定期检查
1.定期检查培养细胞的形态,即形状和外观,对于细胞培养实验取得成功至关重要。
2.除确认细胞的健康状态外,每次操作细胞时通过肉眼和显微镜检查细胞还可早期发现污染征象,避免污染扩散至实验室其他细胞。
原代细胞变质的征象
1.细胞变质的征象包括核周出现颗粒、细胞与基质解离以及细胞质空泡形成。
2.这些变质征象可能为多种原因所致,例如:培养物污染、细胞系衰老或培养基中存在毒性物质,或者这些征象仅表明培养物需要更换培养基。
3.变质严重时将会成为不可逆的变化。
原代细胞培养通风橱的消毒及布局
1.保持细胞培养通风橱内的整洁有序,将所有物品置于直视范围内。
2.向放入通风橱内的所有物品喷洒70%乙醇,擦拭清洁进行消毒。
3.在通风橱中部开阔处放置细胞培养容器;移液器置于右前方易于取用;试剂和培养基置于右后方便于吸取;试管架置于中后部;小型容器置于左后部用于盛放废液。
培养瓶/皿等物品的无菌操作
1.无菌培养瓶、试剂瓶、培养皿等物品使用时方可揭开盖子,不得将其开放暴露于环境中,操作完成后尽快盖上盖子,取下盖子时应将盖子开口朝下放在工作台面上。
2.进行无菌操作时不要说话、唱歌或吹口哨。尽快完成实验,以尽量避免污染。
原代细胞培养中可能的污染物
1 细胞培养污染物主要分为两类:
a.化学污染物,如培养基、血清和水中的杂质、内毒素、增塑剂和去污剂。
b.生物污染物,如细菌、霉菌、酵母、病毒、支原体以及其他细胞系的交叉污染。
c.可通过充分了解污染源以及采用良好的无菌技术,降低污染发生的频率和严重程度。
我司对于科研事业的认真负责一直都是有目共睹,秉承这一份执着,原代细胞在业界常青不倒,并成为众多的知名高校以及国家重点实验室的指定供应商。