上海酶联生物原代细胞铺板的实验操作小技巧

做细胞生物学试验，原代细胞铺板是比较常见的一个试验。但是有很多人铺得不是很均匀，要么中心密周围稀，要么周围密中心稀。遇到这些情况该怎么办呢？接下来就为大家介绍一下在实验过程中操作细胞铺板的技巧。 

 

一般是96孔板，每孔是加100微升细胞悬液，从孔的左边靠近底部加入，加完半边板后，将未加的细胞悬液混一下再继续加剩下的半边板子，都加完后盖上盖子，左手悄悄扶住板的左边，右手悄悄敲击板的右边缘，留意掌握力度，太强或次数太多会导致细胞集成堆，将板顺时针旋转，顺次敲击剩下三个边，静置约5分钟，放入37度培育箱。 6孔板、12孔板或24孔板，均可采用将个孔加入少量无血清培育基，晃动滋润整个孔底。

然后用移液枪吸至第二孔，同样办法滋润孔底，其它孔一次类推，这样整个孔底都是湿润的，原代细胞悬液会平铺在整个孔底，加细胞悬液的时候能够防止加在中心，中心细胞多，而加在周边晃匀后会出现周边细胞多中心少的现象，细胞涣散较均匀，留意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。细胞悬液加完后，将细胞培育板举高，对着灯光，从底部往上看，看细胞有没有抱团。

然后从底部敲击，使之涣散。假如试验室有平板振动器的话，建议用这个仪器稍振动一下，作用不错，振幅小，频率高。 细胞要尽量打散，大部分呈单个状态。离心后，要充沛悬浮。还有转移到六孔板后，需求晃动，晃的时候不要让细胞液转圈，不然细胞就全被带到中心去了，就会不均匀。 一瓶细胞长满后，正常处理，在培育瓶里吹匀，然后铺6孔板，每孔2毫升，铺完之后不必调查直接用酒精棉擦拭，然后放到培育箱里，轻微的左右前后各三圈。基本上24小时之后再调查，每孔的细胞都会很均匀。

 计算好所需求的悉数液体量和细胞量，混匀后，加到六孔板里，六孔板按横8字型晃，显微镜下调查，假如不均匀，按上述办法再晃。假如细胞未计数直接种的话，在种六孔板的过程中，随时晃一下混匀用的瓶子。放在水平板面上先上下移动，再左右移动，每个方向5到6次，但摇晃后直接放入培育箱中，不要再做过多的运动，不然很容易就又聚到中心去了。 

 

 

上海酶联生物科技有限公司具有完善的实验技术开发平台，原代细胞成熟的抗原、抗体研发系统，熟练掌握各种酶联技术，结合公司的研发团队。