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质优价美的ELSIA试剂盒就在您身边
酶联生物取长补短“始终将提高产品质量”当做企业经营的生命线,为了科研结果的准确性和可靠性,付出了全部的热情和精力,当然在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有很多种,下面我们与大家分享检测方法。
检测未知抗体的应用方法:
(1)包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml,在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃夜间存储,次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟(简称洗涤,下同)。
(2)加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
(3)加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml,37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
(4)加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
(5)终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
(6)结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果,反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+"、“-"号表示。
(7)也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白
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