总所周知不同办法制备的抗体往往与多种杂蛋白混杂在一起,为了取得成分相对单一的抗体或将抗体用于特定的用处,就需求进行抗体纯化。抗体纯化分了几种类型,依据用处决定挑选哪种办法进行纯化:
1. 粗纯:将制备抗体的血清或是腹水,细胞上清,直接用盐析法进行处理,这样能够将这些物质里边的其他杂质去掉,取得蛋白的成分,但是由所以粗纯,里边会混有大量的其他蛋白,这样取得的抗体,纯度较低,用于试验中布景比较高。
2.通用型纯化:用抗体结合蛋白Protein A,Protein G或者Protein L。因为不同来历的抗体和这些抗体结合蛋白的结合才能不同,所以需求依据抗体来历挑选运用哪种抗体将诶和蛋白。关于有一些单链抗体,则八成运用protein L来进行纯化。经过抗体结合蛋白的亲和纯化后,溶液中根本只保留了抗体的成分,其他蛋白都去掉了,抗体纯度能够比较高。相对来说,这种办法是大规模抗体制备中,用得最多的纯化办法,许多抗体公司都选用这种办法来对抗体进行纯化。
3.特异型纯化:但是有些抗体,需求纯度特别高,特异性特别好,就不能简略选用上述两种办法进行纯化了。必须要经过将抗原固定制备成特异的亲和纯化柱,再纯化抗体。这个时分得到的就全是针对一种抗原的抗体了,特异性。当然,因为牵涉到抗原固定等操作,成本是相应的。
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