如何继续培养已购买的细胞

为防止客户接纳不妥形成细胞逝世。我公司温馨提示;细胞一般经我司培育两周复苏后送与客户。因细胞是冷冻保存，我司均以冰袋加泡沫箱快递运输.客户在接纳细胞产品时，需按以下办法操作。防止细胞呈现其他问题。
1. 收到细胞株包裹时，请检测细胞株冷冻管是否有冻结景象，若有请当即告诉。细胞株请尽速开始培育，或当即冷冻保存(置于–70 °C，隔夜后，移到液氮)。
2. 冷冻细胞冻结程序: 2.1. 根据细胞株数据单指定之基础培育基品种、血清品种和其它指定之成份和份额，制备培育基。绝大多数之细胞均无法当即习惯不同之基础培育基或不同之血清品种，若因试验需要，有必要有所不同时，必须以缓慢份额逐步改动培育基组成，断定细胞习惯后，方进行所需之试验。 2.2. FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 马血清)，对细胞而言差异极大，请必须根据细胞株资料单指定之血清品种培育之。
3. 将培育基置于37 °C 水槽中回温，回温后喷以70 % 酒精并擦洗之，移入无菌操作台内。取出冷冻管，当即放入37 °C 水槽中快速冻结，水面高度不行挨近或高过冷冻管之盖沿，不然易发作污染。轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化后，以70 % ethanol 擦洗冷冻管外部，移入无菌操作台内。
4. 根据细胞品种和浓度，于无菌操作台内取10 ml 培育基加至T25 或T75 flask中。取出已冻结之细胞悬浮液，缓缓加入T25 或T75 flask 内之培育基，混合均匀，放入37 °C，5 % CO2 培育箱培育。
5. 对绝大多数细胞而言，1 % 以下之冷冻保护剂DMSO，不会对细胞之贴附或活化有不良影响，不需马上由冻结细胞中去除，待第二天断定细胞生长或贴附良好后再去除即可。惟对极少数因对DMSO 灵敏或会形成细胞分解之细胞，需当即去除DMSO 者， 则可将冻结后之细胞悬浮液放入5 - 10 ml 培育基中，离心300 xg (约1000 rpm)，5 分钟，小心移去上清液，加入适量新鲜培育基，将细胞均匀混合后，转移至培育瓶中，再放入37 °C，5 % CO2 培育箱培育。