参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠 IL-13, IL-23 及 COX-2,CREB 表达的影响
丁凌辉1 ,贾育新1* ,成映霞1 ,马文2 ,段永强1 ,明海霞1 ,万生芳1 ,程小丽1
甘肃中医药大学 基础医学院,兰州 730000; 2. 甘肃省人民医院,兰州 730000
“上海酶联文献”[摘要] 目的: 观察参苓白术散对脾虚湿困型溃疡型结肠炎大鼠结肠组织白细胞介素 ( IL) -13,IL-23 及环氧合酶-2(COX-2) ,cAMP 反应元件结合蛋白( CREB) 表达的影响,探究其对溃疡性结肠炎作用机制。方法: 将 48 只 SPF 级 Wistar 大鼠随机分为 6 组,分别是空白组、模型组、参苓白术散高、中、低剂量组和美沙拉秦组,每组 8 只,雌雄各半。除空白组,其余各组采用病证结合法复制脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠模型,即饮食、环境干预等措施联合 2,4-二硝基苯磺酸灌肠。造模成功- 1 - 1 - 1 - 1 进行灌胃。连续灌胃 21 d 后采用酶后,参苓白术散高、中、低剂量组分别按照 24,12,6 g·kg ·d ,美沙拉秦组 0. 2 g·kg ·d 联免疫吸附法( ELISA) 检测大鼠结肠组织 IL-13,IL-23 含量; 实时荧光定量聚合酶链式反应法( Real-time PCR) 检测结肠组织IL-13,IL-23,COX-2,CREB mRNA 表达; 蛋白免疫印迹法( Western blot) 检测结肠组织COX-2,CREB 蛋白表达量。结果: 与空白组比较,模型组大鼠结肠 IL-13 含量和 IL-13 mRNA 表达水平明显降低( P < 0. 05) ,IL-23 含量和 IL-23 mRNA 升高( P < 0. 05) ,COX-2,CREB mRNA 及蛋白相对表达量升高( P < 0. 05) 。与模型组比较,参苓白术散( 高、中、低剂量) 组大鼠结肠 IL-13 含量和IL-13 mRNA 表达均升高,尤以参苓白术散高剂量组最显著( P < 0. 05) ,IL-23 含量和 IL-23 mRNA 降低( P < 0. 05) ,COX-2,CREB mRNA 表达及蛋白相对表达量降低( P < 0. 05) 。结论: 参苓白术散可能调节脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠 IL-13,IL-23 及 COX-2,CREB 的表达,减少结肠的炎症反应。
参苓白术散对 UC 大鼠结肠组织 IL-13,IL-23 的含量的影响
( x珋± s,n = 8)
Table 1 Effect of Shenling Baizhu San on contents of IL-13 and
IL-23 in colon of UC rats( x珋± s,n = 8) |
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|
ng·L - 1 |
||||
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组别 |
剂量 /g·kg - 1 |
|
IL-13 |
|
|
|
IL-23 |
||
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|
空白 |
- |
31. |
71 |
± 1. 31 |
|
8. |
68 |
± 3. 14 |
|
模型 |
- |
25. |
04 |
± 2. 19 |
1) |
23. |
94 |
± 3. 351) |
|
参苓白术散 |
24 |
34. |
66 |
± 5. 28 |
2) |
10. |
58 |
± 2. 282) |
|
|
12 |
30. |
25 |
± 4. 30 |
|
13. |
93 |
± 1. 512) |
|
|
6 |
26. |
88 |
± 2. |
59 |
|
19. |
76 |
± 2. 832) |
美沙拉秦 |
0. 2 |
36. |
15 |
± 6. |
24 |
2) |
9. |
50 |
± 2. 222) |
注: 与空白组比较1) P < 0. 05; 与模型组比较2) P < 0. 05 ( 表 2 ~ 4 同) 。
表 2 参苓白术散对 UC 大鼠结肠组织 IL-13,IL-23 mRNA 表达的影响( x珋± s,n = 3)
Table 2 Effect of Shenling Baizhu San on expression of IL-13 and IL-23 mRNA in colon of UC rats( x珋± s,n = 3)
组别 |
剂量 |
IL-13 |
IL-23 |
/g·kg - 1 |
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
空白 |
- |
1. 000 0 ± 0 |
1. 000 0 ± 0 |
模型 |
- |
0. 082 6 ± 0. 015 11) |
3. 521 5 ± 0. 018 61) |
参苓白术散 |
24 |
3. 595 9 ± 0. 003 52) |
1. 296 8 ± 0. 002 82) |
|
12 |
2. 684 7 ± 0. 013 32) |
1. 577 9 ± 0. 019 12) |
|
6 |
2. 112 7 ± 0. 011 02) |
1. 637 5 ± 0. 032 42) |
美沙拉秦 |
0. 2 |
3. 212 1 ± 0. 010 52) |
0. 084 1 ± 0. 013 72) |
|
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