解读QPCR与PCR的核心差异：从定性到定量

     PCR是1984年开始出现的一种基因检测技术，由于其操作简便、灵敏度高，被广泛应用于基础研究和临床检测，成为分子生物学中必不可少的研究工具。传统的PCR定量，又称为终点PCR定量，是通过检测PCR反应结束后（即平台期）的扩增产物量来估算初始模板量。通常采用琼脂糖凝胶电泳分离PCR产物，并使用荧光染料（如溴化乙锭）染色后，通过比较条带亮度或使用凝胶成像系统进行半定量分析。但在PCR反应中，由于反应体系、反应条件等因素，会影响PCR反应的效率，甚至会出现一些非特异性的扩增产物，因此终点PCR定量并不准确。

    QPCR简介

    实时荧光定量PCR（Real-timequantitativePCR，常简称为qPCR）是一种常用的定量PCR(qPCR)方法。AppliedBiosystems公司在1996年推出了第一台商品化的实时荧光定量PCR仪，极大地推动了该技术的普及和应用。相比于传统的终点PCR，实时荧光定量PCR具有灵敏度高、特异性强、可实现多重反应、自动化程度高、污染风险低、可实时监测结果等特点，在医学临床检测和临床医学研究中具有重要意义。

    QPCR与PCR区别

    荧光定量PCR实时监测与DNA结合的荧光染料激发的荧光；普通PCR通过检测插入DNA中的染料（通常是紫外线）的量来测量最终PCR产物的量。

    1、实时荧光定量PCR与传统PCR反应要求不同

    荧光定量对扩增片段要求较高，一般为100-300bp；普通定量可以扩增较长的片段，如果不需要检测产物分子量，荧光定量可以定量分析产物而不需要电泳，而普通PCR必须进行电泳。

    2、实时荧光定量PCR与传统PCR反应结果不同

    荧光定量可以做到精准定量，而普通PCR做不到。荧光定量可以展示整个扩增过程，扩增效率，溶解温度，直接得到标准曲线等，这是普通PCR做不到的。

    上述是QPCR和PCR区别，PCR技术作为分子生物学基石，为基因研究提供了重要的技术支持。而QPCR在此基础上发展而来，凭借其定量精准、实时监测等优势，极大地拓展了PCR技术的应用范围，尤其在医学诊断、疾病研究等领域展现出巨大的潜力，未来必将在生命科学领域发挥更重要的作用。