阳春四月,酶联生物与您唠唠关于抗体特异性的挑选。特异性的挑选主要需求考虑四个方面:蛋白特异性、种属特异性、试验办法特异性、符号物的特异性。
1、蛋白特异性:
针对需求检测的蛋白查找抗体,几个细节要区分,重组表达的蛋白和内源性蛋白的检测,对抗体的要求是不一样的,留意检查抗体说明书的检测说明。假如重组蛋白不 是全长表达,则需求留意抗体的免疫原区域是否在重组蛋白区域内。内源性蛋白能清楚其剪切与修饰的方式,特殊表型的蛋白需求进行序列比对,并结合抗体免 疫原序列,检查穿插反响的状况。磷酸化蛋白检测需求确认具体位点,不同位点的磷酸化意味着可能有不同的机制存在,不宜混为一谈。
2、种属特异性:
同种蛋白不同物种,有着或大或小的差异。现在大部分商品化抗体都是以人源蛋白序列为模板重组蛋白或规划多肽抗原的,依据蛋白的同源状况与其他种属发生穿插 反响。需求参照说明书注明的可反响种属信息。一些稀有种属很难找到抗体,可以经过蛋白的序列比对,挑选同源序列免疫的抗体,不过一般这种状况生产商不会受 理其关于质量的申述,假如可以申请到免费的抗体样品,则利于抗体挑选。
3、试验办法特异性:
现在运用抗体的试验办法有许多,不同的运用办法过程中,因为对蛋白样品的处理方式不一样,蛋白的含量有差异,对抗体的辨认表位和效价要求都是不一样的。具体 的依据说明书注明的产品应用办法进行挑选。可是生产商一般不会将每个抗体都进行各种试验的检测,现在检测比较多的只是WB、IHC、IF等,假如针对具体 的试验办法没有找到合适的抗体的,可以结合蛋白序列分析和抗体的抗原信息,挑选尽可能有作用的抗体。同样,申请到免费的抗体样品是个很好的途径。
4、符号物的特异性:
一般基于试验操作的试验办法不会运用带有符号的一抗,比如WB、IHC等,都是经过二抗类的试剂符号到达结果出现的目的。
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