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ELISA试剂盒检测不成功的原因

elisa试剂盒即酶联免疫吸附试验,它是一种常用的固相酶免疫测定办法,由于ELISA办法灵敏,特异性强不需要特殊设备,

所以被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因 素较多,并且其操作中有必定的技能要求,

在查验中除正常反响外,有时常可见到一些错误效果!

溶血标本及混有红细胞的血清选用ELISA法检测易产生假阳性。或许是溶血血清中含有过 氧化酶物质,

在洗涤过程中往往难以完全洗脱,它可使 H2O2释放出原生态氧(O),然后催化底物四甲基联苯胺生成可溶性的有色物质,

即显蓝色, 产生假阳性.标本受细菌污染。因菌体中或许含有内源性辣根过氧化物酶,因而,被细菌污染的标本同 溶血标本一样,

亦可产生非特异性显色而搅扰测定效果。

标本保存不妥。在冰箱中保存过久的标本,在间接法ELISA测定中会导致本底过深、形成 假阳性;为打败上述搅扰,

ELISA试剂盒测定的血清标本宜为新鲜搜集;如不能当即测定,5 d 内测定的血清标本可存放于4℃,

1周后测定的血清标本应低温冻存;冻存后融解的标本,蛋白 质部分浓缩,分布不均,应充分混合后再测定,

但混匀时应轻柔,不行激烈振动。

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