尽管ELISA测定的操作步骤非常简略,但有或许会影响测定效果的因素却较多,散布在测定操作的各步之中,
尤以加样、温育和洗板为甚。为协助我们分析查找测定中出现问题的或许原因,特对常见问题及原因概括总结于下表。
ELISA测定中或许会出现的问题及或许的原因问题或许的原因(非试剂盒本身的原因)
ELISA测定现一般为选用手工操作的以微孔板条为固相的测定方式,测定操作非常简略,一般涉及到标本的搜集保存、
试剂准备、加样、温育、大鼠ELISA试剂盒洗板、显色、比色、效果判别和效果报告及解说等方面,
其间任一步骤的不当都会影响测定效果,且尤以加样、温育和洗板等步骤为甚。
1.弱阳性质控样本检测不出温育的时间或温度不行;显色反应时间太短;所用制造缓冲液的蒸馏水有问题
2.大鼠ELISA试剂盒测定的重复性差(相同样本两次测定效果不一致)这是典型的由测定操作引起的问题,包含
(1)加样本及试剂量不准;孔间不一致;
(2)加样过快,孔间发生污染;
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