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上海酶联生物ELISA试剂盒样本处理时的注意事项

 
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每个标本量收集体积=100ul×检测种类,如要做复孔,标本量收集体积= 100ul× 检测种类×2 。
 
对于作某一个具体指标来说,最好先用一系列稀释度作一批标本测定,得出对实验有意义的一个稀释度(即测定剂量反应曲线),然后用一个最适稀释度测定即可。
 
 收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。
 
对收集后当天进行检测的标本,储存在 4 ℃ 备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 条件下保存。
 
 避免反复冻融。标本 2 -8 ℃ 可保存 48 小时, -20 ℃ 可保存 1 个月。 -70 度可保存 6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
 
 血清标本采集时,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以 HRP 为标记的 ELISA 测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。
 
为了保证尿液检测结果的准确性,必须正确收集尿液标本和保存。
 
盛尿容器要清洁干燥。 最好使用一次性的容器(如塑料尿杯),避免因用药并清洗不干净而造成的污染,影响检测结果。
 
尿液标本必须新鲜,留取后,应及时检测或保存,以免细菌繁殖。因在室温中久置后(尤其是夏季)尿中磷酸盐等可析出结晶而干扰检测。
 
 标本宜在新鲜时检测。
 
如有细菌污染,菌体中可能含有内源性 HRP,也会产生假阳性反应。保存过久可发生聚合在 ELISA 中可使本底加深。
 
冻结标本融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。
 
 混浊或有沉淀的标本应先离心或过滤,澄清后再检测。
反复冻融会使蛋白效价降低,所以待测标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。也可加入适当防腐剂。
 
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