描述:
基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)以无活性的酶原形式分泌,活化后能降解细胞外基质的胶原蛋白,又称胶原酶。胶原酶通过影响细胞外基质参与胚胎发育、形态发生、组织重塑等过程,并参与炎症、肿瘤、心血管、神经等许多疾病过程。血浆和组织中的MMP-2、MMP-9参与各种生理与病理过程,其在临床诊断和治疗中的意义日益受到重视1。
本试剂盒采用酶谱法(zymography)检测MMP-2、MMP-9活性。Zymography是一种广为使用的、基于SDS-PAGE电泳和反相凝胶染色的蛋白酶检测方法,其灵敏度可达1 nM,高于ELISA方法2,其基本
原理和程序是:
制备加有胶原酶底物的SDS-PAGE凝胶,含蛋白酶的样品在此凝胶中进行电泳,电泳结束后取出凝胶与酶反应Buffer孵育,凝胶染色与脱色。凝胶中由于含底物蛋白而被深染,形成深色背景,但在有蛋白酶条带的位置,蛋白酶降解凝胶中的底物蛋白,因而不被染色而形成透亮区域,从而能同时指示MMP-2、MMP-9的大小位置(酶谱)及活性。
本试剂盒提供MMP-2、MMP-9特异蛋白底物及酶学反应缓冲液,可检测少至0.1~0.5 µl血液中的MMP-2、MMP-9酶谱及活性,检测灵敏度约为1 nM。试剂盒可进行50次标准小胶检测,如果小胶加样孔为10~15个,则总计可检测500~750个样品。
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