储存条件 : 4℃避光可保存12个月。
CelGreen 核酸染料特点● 无毒性:CelGreen 独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验结果也表明,该染料的诱变性远小于EB。● 灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。● 稳定性高:适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。● 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。● 操作简单:在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需 30 分钟且无需脱色或冲洗,即可直接用可见光凝胶透射仪观察。● 适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。● 与标准凝胶成像系统以及可见光激发的凝胶观察装置完美兼容:适用于使用254nm 激发的紫外凝胶成像系统或可见光激发的凝胶观察装置。
CelGreen 使用方法简介1.胶染法(用法同EB)(推荐方法)(1) 制胶时加入CelGreen 核酸染料。(例如:每50mL 琼脂糖溶液中加入5μL CelGreen 10,000× 储液,以此比例类推)。(2) 按照常规方法进行电泳。注意事项:此方法染色染料用量相对较少。500 μL染料大约可以做100块 50mL的胶。由于CelGreen 具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将CelGreen 储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。CelGreen 兼容所有常用的电泳缓冲溶液。如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
2.泡染法(1) 按照常规方法进行电泳。(2) 用H2O将CelGreen 10,000× 储液稀释约3,300倍到0.1M NaCl中,制成3× 染色液。(例如将15μL CelGreen 10,000× 储液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。(3) 将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的3× 染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右。
注意事项:用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。3× CelGreen 染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。几种核酸染料比较
名称
灵敏度
稳定性
对DNA迁
移的影响安全性
适用性
CelRed
高
高
条带不弯曲,DNA片段不迁移
①是一种独特的油性大分子,不易挥发升华,不易吸入人体,不能穿透细胞膜进入活体细胞内,安全无毒。
②艾姆斯氏测试结果表明,CelRed在凝胶染色浓度下完全没有诱变性,因此完全没有致癌毒性。
通用大小片段电泳染色,与EB有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置。标准的EB滤光片或SYBR滤光片都适用,使用普通紫外凝胶透射仪观察即可,在300nm紫外光附近可得到最佳激发。
CelGreen
高
高
条带不弯曲,DNA片段不迁移
①是一种独特的油性大分子,不易挥发升华,不易吸入人体,不能穿透细胞膜进入活体细胞内,安全无毒。
②艾姆斯氏测试结果表明,CelGreen在凝胶染色浓度下完全没有诱变性,因此完全没有致癌毒性。
通用大小片段电泳染色,适用于使用254nm激发的紫外凝胶透射仪或可见光凝胶透射仪观察。
SYBR Green I
高
低
染料浓度较高时,条带容易弯曲,DNA片段迁移的现象明显
属花菁染料,能透过细胞膜进入活体细胞内,但容易生物降解,不会在体内残留,安全无毒。
100bp以上电泳染色,适用于使用254nm激发的紫外凝胶透射仪或可见光凝胶透射仪观察。
EB
低
高
条带不弯曲,DNA片段不迁移
①分子量小,易挥发升华,易吸入人体,不易生物降解,在体内长期残留。
②艾姆斯氏测试结果表明,EB容易引起有机体突变,是一种强诱变剂,具有高致癌性。
100bp以上电泳染色,背景荧光信号高;使用普通紫外凝胶透射仪观察。
Goldview
低
高
条带不弯曲,DNA片段不迁移
①主要成分为吖啶橙,是一种煤焦油提取物,具有高毒,致癌,高诱变性。
②易挥发升华,易吸入人体,能穿透细胞膜进入活体细胞内,不易生物降解,在体内长期残留。
100bp以上电泳染色,背景荧光信号高;适用于使用254nm激发的紫外凝胶透射仪或可见光凝胶透射仪观察。
特别提醒:
如果您使用的是紫外成像仪,请选择CelRed;如果您使用激光成像仪或希望在可见光下观测,请选择 CelGreen。尽管在凝胶染色方面,CelGreen是一种优于 SYBR Green I 的替代染料,但并不推荐在qPCR 中使用 CelGreen 。对于qPCR,我们推荐专为PCR设计的 SUPER Green I(效果同SYBR Green I,Cat# 003)。
在极少数情况下,质粒经某些酶切后的DNA样品会出现拖尾和分辨率降低,此时建议同时尝试两种染色方法以决定哪种方法更加合适。相关产品:
目录号
产品名称
规格
009
CelRed核酸染料(10,000× 水溶液)
500 μL
010
CelRed核酸染料(10,000× DMSO溶液)
500 μL
011
CelGreen核酸染料(10,000× 水溶液)
500 μL
012
CelGreen核酸染料(10,000× DMSO溶液)
500 μL
产品标签
用户评论(共6条评论)
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