T4 DNA连接酶
中文名称: T4 DNA连接酶
英文名称: T4 DNA Ligase
产品规格: BR,1u/ul
包装: LC1000U
产品规格: BR,5u/ul
包装: 200U/1000U
产品规格: BR,30u/ul
包装: HC5000U
CAS号:9015-85-4
分子量:55.3kDa,单体
T4 DNA连接酶级别:BR
分子量:55.3kDa,单体
来源:含有T4噬菌体克隆基因30的大肠杆菌
浓度:1u/ul(200CEU/ul)
浓度:5Weiss u/ul(1000CEU/ul)
浓度:30Weiss u/ul(6000CEU/ul)
活性定义:是指在ATP-PPi交换反应中,37℃、30分钟内将1nmol [32PPi]转换为Norit可吸收形式所需的酶量(weiss单位,1个weiss单位相当于约200个粘性末端连接单位。1个粘性末端连接单位:20ul反应体系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端)中,在16℃、30分钟内连接50%连接HindIII酶切的Lambda DNA 产物所需的酶量)
酶活性分析混合物:66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]
保存液组分:20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT,0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油
10×T4 DNA Ligase缓冲液(#B69):400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP(PH7.5,25℃)
抑制剂:当反应体系中NaC1或KC1的浓度超过200 mM时,可强烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活:65℃加热10分钟或70℃加热5分钟
注意:T4 DNA Ligase与DNA结合会改变条带的琼脂糖凝胶电泳迁移率,为避免此现象,电泳前需处理样本或分子量标准。样本处理如下:样本与Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加热5分钟或65℃加热10分钟后冰浴保存;转化时,连接产物的体积不得超过感受态细胞体积中的10%;电转化之前,先用氯仿抽提方法除去连接混合物中的T4 DNA Ligase,然后经乙醇沉淀纯化抽提产物
质量控制:测试表明无内切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能检测:粘性末端或平末端DNA的连接能力
性状:液体。该酶催化双链DNA或RNA中毗邻的5'磷酸基团和3'-羟基末端之间形成磷酸二酯键,还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA复合体中的单链切口,连接DNA的粘性和平末端,但该酶对单链核酸无酶活性。该酶需要辅因子ATP
T4 DNA连接酶用途:生化研究。粘性末端或平末端双链DNA的连接;双链寡核苷酸接头与双链DNA连接;双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复;连接酶介导的RNA检测;位点特异性突变;扩增片段长度多态性
保存: -20°C
产品属性 英文名称 T4 DNA Ligase CAS号 9015-85-4 保持条件 -20°C 产品标签
用户评论(共6条评论)
- 核糖核酸酶抑制剂
- 离析酶R-10
- 胰蛋白酶(猪胰)
- 磷酸葡萄糖变位酶
- 蜗牛凝集素
- β-葡萄糖苷酶
- 氯化溶菌酶
- 20mg/ml蛋白酶K溶液
- α-淀粉酶(枯草杆菌)
- 乳酸脱氢酶(兔肌)
- 去核酸酶试剂
- 己糖激酶
- 谷氨酸脱氢酶
- 核糖核酸酶H
- 胰酶粉
- α-半乳糖苷酶
- 胃蛋白酶抑制剂
- 胰凝乳蛋白酶(牛)
- 果胶酶
- 蛋白酶(枯草杆菌)
- 胰蛋白酶(牛胰)
- RNase&DNase清除剂
- 胶原酶
- 酸性蛋白酶
- 半纤维素酶
- 脂肪酶(猪胰)
- 葡萄糖氧化酶
- 脱氧核糖核酸酶Ⅱ(猪脾)
- 抗蛋白酶
- 肌酸激酶(兔肌)
- β-葡萄糖苷酸酶
- 蜗牛酶
- β-半乳糖苷酶
- 纤维素酶R-10
- 糖化酶
- 蚯蚓酶
- 高峰α-淀粉酶
- α-葡萄糖苷酶
- 果胶酶Y-23
- 乙酰辅酶A
- 心肌黄酶
- 透明质酸酶
- 溶菌酶(蛋清)
- 链霉蛋白酶
- 脂肪酶(假丝酵母)
- 中性蛋白酶
- 胰蛋白酶抑制剂
- β-淀粉酶
- 木瓜蛋白酶
- 过氧化物酶(辣根)
- 核糖核酸酶T1
- 纤维素酶(绿色木霉)
- 胃蛋白酶(猪胃粘膜)
- G-6-P脱氢酶
- 脱氧核糖核酸酶Ⅰ(牛胰)
- 磷酸葡萄糖异构酶
- 过氧化氢酶(牛肝)
- 溶葡球菌酶
- D-α-氨基氧化酶
- 菠萝蛋白酶
上海酶联生物科技有限公司
Shanghai Enzyme-linked Biotechnology Co., Ltd.
订购热线:4008-898-798 / 021-54720761
传 真:021-54222852
地址:上海市松江区云凯路66号T2楼1603室
酶联官方手机二维码
微信扫描二维码,参与酶联活动,
劲爆优惠触手可得!
本网站销售的所有产品仅用于工业应用或者科学研究等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。