中文名称:免疫组化试剂盒(适用于兔/小鼠一抗)
英文名称:Immunohistochemistry Kit(Apply to rabbit or mouse primary antibody)
相关类别:抗体相关支持试剂
储 存:冷藏(2-8℃)概 述该免疫组化试剂盒适用范围为石蜡包埋组织切片,也可用于固定后的冰冻切片。特点操作简便:无需太多准备,拿到试剂盒既能开展试验。 重现性好:实验结果重复性高。应用用于免疫组织化学实验,两种包装分别可用于20张和50张切片。使用说明1. 组织固定:在脱蜡之前,将切片60°C恒温箱中烘烤60分钟。2. 脱蜡:将切片用二甲苯浸泡10分钟,更换二甲苯后再浸泡10分钟。3. 水化:分别用无水乙醇浸泡5分钟;95%乙醇中浸泡5分钟;85%乙醇中浸泡5分钟;75%乙醇中浸泡5分钟。4. 洗涤:ddH2O浸泡5分钟,清洗3次。5. 抗原修复(煮沸法):压力锅中加入足以淹没切片的10 mmol/L的枸橼酸盐缓冲液(pH 6.0)(配制:将复性剂溶于相应体积 ddH2O中,混匀),加热至沸腾,切片置耐热塑料切片架上,放入锅中,盖好锅盖,扣上压力阀,继续加热,设置保压3 min,时间到后打开放气阀放气,压力归零后开锅盖将内锅取出放置室温冷却,待溶液冷却至室温后取出切片(约30 min)。6. 洗涤:ddH2O浸泡5分钟,清洗2次,PBST浸泡5分钟,清洗2次。7. 灭活酶:每张切片滴加50 μl灭活酶试剂,室温避光处理15分钟。8. 洗涤:PBST浸泡5分钟,清洗3次。(第一次迅速倒掉)9. 封闭:每张切片滴加3% BSA-PBST 50 μl,湿盒中室温封闭30分钟。10. 加一抗:弃去封闭液,每张切片滴加50 μl一抗,4℃湿盒中孵育过夜或37°C 1小时。11. 复温:次日取出切片,室温复温40分钟。12. 洗涤:PBST浸泡5分钟,清洗3次。(第一次迅速倒掉)13. 加酶标二抗:每张切片滴加HRP标记的二抗(抗兔/小鼠)25μl,室温或37°C孵育30分钟。14. 洗涤:PBST浸泡5分钟,清洗3次。(第一次迅速倒掉)15. 显色(DAB法):每张切片滴加50 μl显色液(显色液配制:85% ddH2O+ 5% DAB缓冲液+5% DAB底物+5% DAB色原,避光现配现用,按需要量配制),湿盒中显色5分钟。16. 终止显色:用蒸馏水终止显色反应。17. 复染:每张切片滴加50 μl苏木素体细胞快速染色液,染色5分钟 ,用蒸馏水冲洗干净。18. 脱色反蓝:将切片放入1%盐酸~乙醇中脱色3~5秒后迅速取出放入蒸馏水中终止,再放入PBST中反蓝5分钟。19. 封片:分别在75%乙醇中浸泡5分钟;85%乙醇中浸泡5分钟;95%乙醇中浸泡5分钟;无水乙醇中浸泡5分钟。用二甲苯浸泡10分钟,更换二甲苯后再浸泡10分钟。之后在切片上加中性树胶,加盖玻片。20. 观察:显微镜。
组份
复性剂(溶解前请混匀) HRP标记的二抗(抗兔/小鼠) DAB缓冲液(20×) DAB底物(20×) DAB色原(20×) 苏木素体细胞快速染色液
产品标签
用户评论(共6条评论)
- ATG5抗原(重组蛋白)
- ARL8A抗原(重组蛋白)
- ATOX1抗原(重组蛋白)
- ANAPC10抗原(重组蛋白)
- ADAM17抗原(重组蛋白)
- ACTG1抗原(重组蛋白)
- ACBD4抗原(重组蛋白)
- ANGPT1抗原(重组蛋白)
- AKR1B10抗原(重组蛋白)
- ARHGDIA抗原(重组蛋白)
- AKAP9抗原(重组蛋白)
- ASB9抗原(重组蛋白)
- ACAD10抗原(重组蛋白)
- AP2S1抗原(重组蛋白)
- ANXA2抗原(重组蛋白)
- ADAM7抗原(重组蛋白)
- BCAS2抗原(重组蛋白)
- ANXA1抗原(重组蛋白)
- AKR1B1抗原(重组蛋白)
- ARL11抗原(重组蛋白)
- ARF4抗原(重组蛋白)
- ANP32A抗原(重组蛋白)
- ARL6抗原(重组蛋白)
- ATP6V1E2抗原(重组蛋白)
- ACSBG2抗原(重组蛋白)
- ANAPC13抗原(重组蛋白)
- ACOT2抗原(重组蛋白)
- ALKBH8抗原(重组蛋白)
- AASDHPPT抗原(重组蛋白)
- BID抗原(重组蛋白)
- APIP抗原(重组蛋白)
- ACP3抗原(重组蛋白)
- AURKAIP1抗原(重组蛋白)
- AIF1抗原(重组蛋白)
- BIRC7抗原(重组蛋白)
- ACOT8抗原(重组蛋白)
- ACMSD抗原(重组蛋白)
- ANKRD1抗原(重组蛋白)
- ANXA10抗原(重组蛋白)
- AGER抗原(重组蛋白)
- ASF1A抗原(重组蛋白)
- BCL10抗原(重组蛋白)
- AKR1D1抗原(重组蛋白)
- ADD1抗原(重组蛋白)
- ACY3抗原(重组蛋白)
- A4GALT 抗原(重组蛋白)
- B2M抗原(重组蛋白)
- ADAP1抗原(重组蛋白)
- ARMC10抗原(重组蛋白)
- ABCC6抗原(重组蛋白)
- ARL2抗原(重组蛋白)
- ASPA抗原(重组蛋白)
- ATP6V0D1抗原(重组蛋白)
- ARF6抗原(重组蛋白)
- ALKBH2抗原(重组蛋白)
- ANGPTL4抗原(重组蛋白)
- ACVR1B抗原(重组蛋白)
- BOLL抗原(重组蛋白)
- APOC1抗原(重组蛋白)
- ATG12抗原(重组蛋白)
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