大鼠肠成纤维细胞
产品简介 :
产品名称 :大鼠肠成纤维细胞
产品品牌 :酶联生物
组织来源 :肠组织
产品规格 :5×105cells/T 25细胞培养瓶
细胞简介 :
大鼠肠成纤维细胞分离自肠道组织;肠道指的是从胃幽门至肛门的消化管。肠是消化管中最长的一段,也是功能最重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。
大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的,大肠主要浓缩食物残渣
,形成粪便,再通过直肠经肛门排出体外。
肠道堪称身体最劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足够的养分,其实它的功能还远不止此——它还是机体内最大的微生态系统。各种哺乳动物肠的结构和功能基本相似。肠壁结构一般分4层,由外向内依次为:浆膜层(腹腔脏层),平滑肌层,黏膜下层和黏膜层。
平滑肌层的外层为纵行肌纤维,内层为环形肌纤维,两者都以螺旋式走行,它们以收缩和舒张来完成肠的机械性消化。黏膜层又分为3层:靠近黏膜下层的是一层平滑肌,称为黏膜肌层。其次为结缔组织,又称为固有层。
最后面向肠腔的是一层柱状上皮细胞构成的黏膜。成纤维细胞(Fibroblast)是 疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。
成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定
条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和
组织缺损的修复有着十分重要的作用。
方法简介 :
酶联生物实验室分离的大鼠肠成纤维细胞采用胶原酶-胰酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶 。
质量检测 :
酶联生物实验室分离的大鼠肠成纤维细胞经Vim entin免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以
上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息 :
培 养 基 :含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :每2-3天换液一次
生长特性 :贴壁
细胞形态 :成纤维细胞样
传代特性 :可传2-3代
传代比例 :1:2
消 化 液 :0.25% 胰蛋白酶
培养条件 :气相:空气,95% ;C O2,5%
大鼠肠成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用酶联生物配套的专用生长培养基及正确
的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养状态 :
发货时发送细胞电子版照片
使用方法 :
大鼠肠成纤维细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈成纤维细胞样,在酶联生物技术部标准操作流程下,细胞可传2-3代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作 :
1.取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2.贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1m g/m l),明胶(0.1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项 :
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和酶联生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。