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Jurkat clone A3[A3]人T淋巴细胞白血病细胞

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人细胞系

Jurkat clone A3[A3]人T淋巴细胞白血病细胞

货号：ml098125
1×10⁶cells/T25培养瓶
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Jurkat clone A3[A3]人T淋巴细胞白血病细胞说明书

常见问题

Jurkat clone A3[A3]人T淋巴细胞白血病细胞

基本信息 ：

产品品牌：酶联生物

中文名称：人T淋巴细胞白血病细胞

细胞简称：Ju rkatcloneA 3[A 3]

细胞形态：淋巴母细胞样

生长特性：悬浮细胞

培养环境：空气，95% ；CO2，5% 37℃

冻存条件：55% 基础培养基+40% FBS+5% D M SO液氮

完全培养基：RPM I-1640(P M 150110)＋10% F B S(164210-50)＋1% P /S(P B 180120)

传代步骤 ：

可通过补充新鲜培养基或者离心换液两种方式维持培养，离心转速参考1200 rpm （250g左右），离心3分钟

传代比例（密度）：3×10^ 5-5×10^ 5cells/m L

换液频次：2~ 3次/周

细胞背景描述 ：

A 3亚克隆株来自Jurkat细胞系，是用Fas抗体处理Jurkat细胞，随后有限稀释法获得一个细胞系。A 3细胞系对Fas介导的凋亡产生自发抗性的比例较低，得到的亚克隆对Fas-介导的凋亡十分敏感。挑选对新霉素具有抗性的野生型A 3细胞，并三次用移码突变诱变剂IC R -191进行处理以分离具有抗Fas抗体杀伤的隐性突变体。

供体年龄：男

组织来源：T细胞白血病，T淋巴细胞

细胞类型：肿瘤细胞

肿瘤类型：白血病细胞

生物安全等级：1

细胞保藏中心：ATCC ; C R L-2570

收到常温细胞后如何处理 ：

细胞培养详细操作步骤请参照酶联生物细胞培养操作指南

1. 收到常温细胞后，及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。

2. 用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。

4. 静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。

5. 若观察到异常或者对细胞有疑问，请及时跟我们联系；对于细胞培养操作及培养。可跟我们的技术支持交流。

售前须知 ：

该细胞为悬浮细胞，请注意离心收集细胞悬液；请勿直接倒掉细胞培养液。

用户评论(共6条评论)

办事效率蛮高，几天，就帮我搞定了这个试剂盒，谢谢！
盒子蛮不错，包含所需试剂，并提供了中英文双版说明书及增值税发票，很正规，销售人员的态度也谦和。
灵敏度不错，重复性也行，试剂盒在我做的这些实验中，与国内同行的盒子相比来说，性价比挺高的，尤其是价格占有不错的优势，赞一个！
操作挺方便的，也简单，当然，这也多亏了公司的技术人员详细的实验指导，很好，谢谢，实验也相当成功。
实验出来的标准曲线很不错（很优美），而且价格相对合理，技术指导很到位......
我购买了两盒，批次最新，保质期内，实验结果做出来了，货到的挺快，那么远，几天就到了，加上我做实验，一共五天就搞定了。
经朋友介绍，购买了此公司的ELISA试剂盒，用过，还不错，实验效果很好，基本达到实验参数要求，如果，下次还做实验的话，我还买这家的，朋友这几年都在用这家的（长期订货）。

酶联生物经过不断的实验优化和改进，积累了大量的经验，拥有专业的酶联研发团队。利用专业的酶联免疫技术自主研发的elisa试剂盒，能对血清及其它样本定量检测抗原，定性检测特异性抗体。优质的试剂，先进的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA检测的方便性、稳定性、重复性和可靠性方面都具有很大的优势。

ELISA检测技术服务内容：
1、双抗体夹心法检测抗原 2、间接法检测抗体 3、为客户提供各种ELISA技术进行样本检测。

以上代测费，凡购买本公司试剂盒，我们免费代测！
凡购买本公司目录任何一种酶联免疫检测试剂盒，您只需将需要检测的动物（Human, Rat, Mouse, Rabbit, Monkey, Pig……）种类和检测指标（白介素类、激素类）及标本数量（48T/96T）通知公司业务员即可。在接到客户标本当日起，现货产品一周内将检测报告交到客户手中！
欢迎各科研单位在各种项目上与我们公司开展不同层次的密切合作，以双赢求发展，共同进步，为中国检测事业的发展积累经验。

二、样本要求
在收集标本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测，对收集后当天就进行检测的标本，及时储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，请造模取材后，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差，蛋白极易降解，直接影响实验质量，所以避免反复冻融。代测放免标本的客户取材前须向我司销售人员索要说明书，具体操作注意事项请与我司技术人员沟通。

液体类标本：标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。

血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

血浆：应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入10%（v/v）抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1%heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

尿液、胸腹水、脑脊液：用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.0-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清置于-20度或-70度保存，如有必要，可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

三、寄标本时需注明以下情况：
1、标本编号；2、所测项目；3、是否做复孔；3、联系方式；4、实验后标本是否寄回。

客户须知：
客户应对所提供的材料及信息负责，如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。

为什么要进行细胞系的STR鉴定

什么是细胞系鉴定？

所谓细胞系鉴定即通过 STR（短串联重复）图谱所建立细胞系的遗传特征。一株细胞系的遗传特征确立后，细胞系可以通过定期的检测，以防止出现细胞系被误认或交叉污染的情况。

为什么要进行细胞系鉴定？

首先进行细胞系 STR鉴定是很重要的。很多生物医药的研究都采用培养细胞来进行，据估计，15-20%的实验室，实验中所使用的细胞已经不是原来的细胞系，或者与其它细胞系发生了交叉污染。显然，细胞系遭到污染、特征鉴别错误，将会极大的威胁着基于这些细胞而发表的论文质量和研究发现的正确性。为此，很多细胞库现在都要对提交来的细胞系进行鉴定，并对细胞系之间的交叉污染进行监测。

什么细胞最容易污染别的细胞？

Hela细胞。五十多年来，Hela细胞系被广泛用于医学和生物学领域的研究，对当代生命科学的发展屡建奇功，是名副其实的生物学研究的亲历践行者。同时很多被广泛研究的细胞系都被Hela细胞淹没，因为她长得快，当你发现自己的一个培养瓶里的细胞突然长得很好，而以后都用它传代做实验的话，十之八九是搞错了。早在1967年，遗传学家StanleyGartler发现HEp-2和INT407这两种细胞系都是生物学领域研究最多的肿瘤细胞系——Hela细胞。

有哪些细胞曾被 Hela污染？

lnt-407、HEp-2、WISH（人羊膜细胞）、Acc-M（人原发性延腺癌细胞）、Bcap-37 （人乳腺癌细胞）、HAC-84（人肺腺癌克隆）、Hepatoma（人肝癌细胞）、HUL-42（人肺腺癌细胞）、CNE（人鼻咽癌细胞）、SPC-A-1（人肺腺癌细胞）、Tca-8113（人舌鳞癌细胞）、YTMLC（个旧肺鳞癌细胞）等一百余种。

如何进行细胞系鉴定？

细胞系鉴定目前主要基于国际身份认证委员会的标准。依据该标准，可以通过多重荧光 PCR技术，对人源8个STR位点以及1个性别决定位点进行检测。我公司做的STR 鉴定，除以上9个位点之外，将对检测细胞加做12个其它位点信息。

什么时候需细胞系鉴定？

1）当建立或获得一个新的细胞系时；

2）一个涉及到细胞试验项目开始/结束时；

3）在细胞冻存之前，或细胞已连续培养2～3个月时；

4）发表文章或申请课题经费前；

5）细胞系表现不稳定或结果与预期差别较大时；

6）当实验室使用超过一种细胞系时，所有细胞系应先鉴定以排除交叉污染的可能。

如何提供鉴定样本？

我公司建议客户对每种进行检测的目的细胞复苏好 T25培养瓶寄送活细胞，或者对每种需要进行检测的细胞单独收集在1.5ml离心管中，细胞数目不少于10的6次方个。细胞需要离心沉淀，并且以PBS清洗尽可能去除上清培养基，沉淀进行冰冻（干冰）保存与寄送。（推荐复苏好T25培养瓶常温寄送活细胞，细胞数目不少于10的6次方个）

如何知道细胞系是否发生交叉污染了？

如果存在细胞系之间发生交叉污染，而且鉴定用的细胞可能有两种以上的细胞系时，那么在进行 STR位点检测的时候，多个位点会出现两个以上的峰。峰高值表示该等位基因的信号强度，理论上峰值与样本的DNA浓度有直接的关系。因此，存在交叉污染的混合细胞系中，其中一个位点中某些峰会明显高于其他的峰，其中大峰是属于混合细胞系中那个主要细胞系，而小峰则属于那个次要细胞系。值得注意的是，当发生两个或以上细胞混合的时候，检测结果看起来非常像细胞系的“遗传不稳定”——当一个细胞系存在亚群时，尤其是一些癌细胞系，由于遗传不稳定的存在，在一些位点的STR特性会不同。因此经验丰富的分子专家是非常重要的，他能够帮助分析复杂的电泳图谱（STR峰图），从而判断是否由于发生细胞系交叉污染而导致多等位基因情况。

如何根据 STR数据判断细胞系的身份？

收到细胞系鉴定结果以及 STR信息，可以与参考数据库进行比对。如果细胞样本的每个STR位点和参考细胞STR位点都能重合匹配，即说明该细胞系正确，反之则说明你的细胞系可能被错误标记，交叉污染或发生遗传不稳定。一般说来，匹配度≥80%即可认为该细胞系正确，匹配度＜80%则说明该细胞系的来源需要被怀疑。

提示 : 如果细胞系被鉴定出发生交叉污染或错误标记，则需要拿更早代数的细胞进行鉴定，从而找到问题的起源或者直接从可靠的机构购买一株新的细胞系。

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Jurkat clone A3[A3]人T淋巴细胞白血病细胞

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