天冬酰胺酶(ASNase/asparaginase)活性测定试剂盒微板法/96样
产品简介:
天冬酰胺酶(EC 3.5.1.1,ASNase)是一种酰胺水解酶,能够将 L-天冬酰胺脱去氨基生成 L-天冬氨酸和氨。该酶具有抗肿瘤活性,在食品和医药等领域应用十分广泛。
天冬酰胺酶(ASNase)催化天冬酰胺水解成天冬氨酸和氨,利用氨在强碱的环境下与次氯酸盐和苯酚作用,生成水溶性染料靛酚蓝,溶液颜色稳定。其在 630nm 处有特征吸收峰,通过检测氨增加的速率,即可计算该酶活性大小。
所需的仪器和用品:
酶标仪、96 孔板、台式离心机、可调式移液枪、研钵、冰和蒸馏水。
天冬酰胺酶(ASNase)活性测定:
1、样本制备:① 组织样本:称取约 0.1g 组织(水分足的样本可取 0.2-0.5g),加入1mL提取液;进行冰浴匀浆。12000rpm,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
[注]:也可以按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例提取。
② 细菌/细胞样本:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
[注]:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(104):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
酶联生物经过不断的实验优化和改进,积累了大量的经验,拥有专业的酶联研发团队。利用专业的酶联免疫技术自主研发的elisa试剂盒,能对血清及其它样本定量检测抗原,定性检测特异性抗体。优质的试剂,先进的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA检测的方便性、稳定性、重复性和可靠性方面都具有很大的优势。
ELISA检测技术服务内容:
1、双抗体夹心法检测抗原 2、间接法检测抗体 3、为客户提供各种ELISA技术进行样本检测。
以上代测费,凡购买本公司试剂盒,我们免费代测!
凡购买本公司目录任何一种酶联免疫检测试剂盒,您只需将需要检测的动物(Human, Rat, Mouse, Rabbit, Monkey,
Pig……)种类和检测指标(白介素类、激素类)及标本数量(48T/96T)通知公司业务员即可。在接到客户标本当日起,现货产品一周内将检测报告交到客户手中!
欢迎各科研单位在各种项目上与我们公司开展不同层次的密切合作,以双赢求发展,共同进步,为中国检测事业的发展积累经验。
二、样本要求
在收集标本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测,对收集后当天就进行检测的标本,及时储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,请造模取材后,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差,蛋白极易降解,直接影响实验质量,所以避免反复冻融。代测放免标本的客户取材前须向我司销售人员索要说明书,具体操作注意事项请与我司技术人员沟通。
液体类标本:标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。
血清:室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。
血浆:应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,加入10%(v/v)抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1%heparin
或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。
尿液、胸腹水、脑脊液:用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。
细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.0-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清置于-20度或-70度保存,如有必要,可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
三、寄标本时需注明以下情况:
1、标本编号;2、所测项目;3、是否做复孔;3、联系方式;4、实验后标本是否寄回。
客户须知:
客户应对所提供的材料及信息负责,如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。
五种常见生化试剂盒的应用方法
生化试剂盒的使用主要是为了检测样品中是否含有某种酶或者是某种维生素等物质,检测的主要目的也是为了确保检验结果的准确性。
酶标仪
1. 酶标仪是一种仪器,其原理是以酶催化底物产生有色产物,通过测定吸光度值来测定物质的含量,酶标仪主要有比色法、比浊法、免疫法和光度法四种。
2. 比色法是检测维生素类物质常用的方法之一,在临床上也被广泛应用,以酶标仪为例,一般都是采用比色法来检测维生素类物质的含量。
3. 免疫法和光度法是用来检测抗体的常用方法,但由于抗体有一定的免疫原性,在临床上并不常用。酶标仪既可以检测抗体也可以检测抗原,其功能比较齐全。
时间分辨荧光检测
时间分辨荧光技术(TRFIA)是一种基于荧光染料标记的荧光检测技术,该技术基于时间分辨荧光显微镜上的荧光染料标记的探针,并在一定时间内激发、发射荧光,通过对样品进行检测,获得被测物质的光吸收曲线,从而判断出样品中被测物质含量。这种检测方法可以用来检测 DNA、蛋白质以及生物大分子等物质。
酶联免疫吸附检测
酶联免疫吸附检测法(ELISA)是应用酶的特异性结合反应进行抗原抗体的标记和检测,是目前最常用的一种定性和定量分析方法,在科研中,酶联免疫吸附检测主要用于肿瘤标志物、药物代谢产物、药物浓度、食品污染物、环境污染物等的测定,具有快速、准确、简便等优点。
化学发光免疫分析
化学发光免疫分析技术(Chemiluminescence immunoassay, CLIA)是利用鲁米诺-过氧化物酶(RGO)和化学发光底物的化学反应作为信号分子,将待测抗原与标记抗体(或抗原)进行特异性结合反应,并在一定条件下使标记抗体或抗原和反应产物中的化学发光信号放大,从而检测待测标本中的目标分子,化学发光免疫分析技术具有操作简单、灵敏度高、特异性好等优点,广泛应用于临床上疾病的诊断和药物研究中。
流式细胞仪
流式细胞仪是一种可以同时检测多种细胞类型的仪器,也可以检测多种细胞类型,生化试剂盒在科研中的应用主要是用于检测细胞的种类,用于研究细胞的特性以及变化规律,分析和判断细胞之间的联系。
上海酶联生物科技有限公司经营的生化试剂盒可以通过对生化试剂盒进行不同类型、不同程度的分析,了解不同样本中是否含有某种物质或者某种维生素等,通过对这些物质的分析,我们可以更好地了解不同样本中所含有的成分和变化规律,目前市面上有很多可直接使用的流式细胞仪,通过各种生化试剂盒,而我们可以直接在仪器上进行操作,进行多种类型细胞的检测。