无蛋白细胞冻存液
产品简介
上海酶联生物供应的无蛋白细胞冻存液,是一种新型的快速冻存细胞的保护液,可将细胞置于-80℃直接冷冻保存。内含天然抗冻蛋白(Natural antifreeze protein),不含动物来源的血清成分,能够有效提高细胞冻存活率和复苏活力,减少各类病毒、霉菌和支原体等的污染,确保冻存细胞安全,能够满足大部分体外培养细胞的冻存需求。
产品特色
1. 即开即用,方便省时。
2. 无血清成分,化学成分明确。
3. 快速冷冻,可直接置于-80℃冰箱冷冻。
4. 高复苏活率,有效保护细胞。
已验证细胞
目前已验证的细胞:CHO,MCF-7, HepG2, SK-OV-3, MDCK,NIH-3T3,HUVEC, HEK-293,Hela,A549,NCI-H460,HUSMC, BMSC,PC12,RAW264.7, C2C12,CHO,COS7,DU145等50余种, 细胞复苏活率高达90%以上 。
使用方法
1. 收集悬浮细胞或贴壁细胞,离心去除上清培养液。
2. 加入适量的细胞冻存液,重悬细胞,调节密度至1~5×106个/mL。
3. 将加有冻存液的细胞悬液分装至冻存管中。
4. 将冻存管直接转移至-80ºC冰箱中冷冻保存。
储存条件
2~8℃保存,一年有效;-20℃保存,两年有效。
注意事项
1. 请选择对数生长期细胞进行冻存。
2. 冻存液加入细胞后,请尽快放入-80℃冰箱冻存。
3. 本产品冻存细胞可以在-80℃冰箱保存3年以上。
4. 若需长期冻存细胞,请转移至液氮罐中贮存。
5. 冻存液中含DMSO成分,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套。
用户评论(共6条评论)
酶联生物经过不断的实验优化和改进,积累了大量的经验,拥有专业的酶联研发团队。利用专业的酶联免疫技术自主研发的elisa试剂盒,能对血清及其它样本定量检测抗原,定性检测特异性抗体。优质的试剂,先进的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA检测的方便性、稳定性、重复性和可靠性方面都具有很大的优势。
ELISA检测技术服务内容:
1、双抗体夹心法检测抗原 2、间接法检测抗体 3、为客户提供各种ELISA技术进行样本检测。
以上代测费,凡购买本公司试剂盒,我们免费代测!
凡购买本公司目录任何一种酶联免疫检测试剂盒,您只需将需要检测的动物(Human, Rat, Mouse, Rabbit, Monkey,
Pig……)种类和检测指标(白介素类、激素类)及标本数量(48T/96T)通知公司业务员即可。在接到客户标本当日起,现货产品一周内将检测报告交到客户手中!
欢迎各科研单位在各种项目上与我们公司开展不同层次的密切合作,以双赢求发展,共同进步,为中国检测事业的发展积累经验。
二、样本要求
在收集标本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测,对收集后当天就进行检测的标本,及时储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,请造模取材后,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差,蛋白极易降解,直接影响实验质量,所以避免反复冻融。代测放免标本的客户取材前须向我司销售人员索要说明书,具体操作注意事项请与我司技术人员沟通。
液体类标本:标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。
血清:室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。
血浆:应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,加入10%(v/v)抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1%heparin
或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。
尿液、胸腹水、脑脊液:用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。
细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.0-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清置于-20度或-70度保存,如有必要,可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
三、寄标本时需注明以下情况:
1、标本编号;2、所测项目;3、是否做复孔;3、联系方式;4、实验后标本是否寄回。
客户须知:
客户应对所提供的材料及信息负责,如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。
贴壁培养与悬浮培养选哪个?
细胞培养的优势在于能够控制细胞繁殖的物理化学环境(
即温度、
pH值、渗透压、O2和CO2张力
)和生理环境(即激素和营养浓度
)。除温度外,培养环境由生长培养基控制。虽然细胞培养的生理环境不如其物理化学环境明确,但是通过更好地了解血清成分、确定增殖所需的生长因子以及更好地了解培养过程中的细胞微环境(即细胞间相互作用、气体扩散、细胞
-基质相互作用),现在
酶联生物可以采用无血清培养基进行一些细胞系的培养。
目前主要有两种基本的细胞培养体系
1. 一种是使细胞在人工基质上单层生长(贴壁培养)。
2. 一种是使细胞在培养基中自由漂浮生长(悬浮培养)。
贴壁培养
来自脊椎动物的大多数细胞,除了造血细胞系和少数其他细胞系,都是贴壁依赖性的,必须在经过专门处理以允许细胞粘附和扩散的合适基质上培养。
悬浮培养
但许多细胞系也可采用悬浮培养。大多数市售昆虫细胞系在单层或悬浮培养物中生长良好。悬浮培养细胞可在未经组织培养处理的培养瓶中培养,但随着培养物体积与表面积之比(通常为
0.2-0.5mL/cm2)的增加,阻碍了气体的充分交换,因此需要对培养基进行搅拌。这种搅拌
一般通过磁力搅拌器或者旋转瓶实现。
以下是贴壁培养与悬浮培养两种培养方式在适用类型,传代方式,采用酶法,细胞生长,培养方法,实验结果方面的详细对比。
贴壁培养
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悬浮培养
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需要使用经过组织培养处理的容器
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无需通过酶法或机械方法解离细胞
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细胞生长受到表面积限制 ,
从而可能限制细胞产量
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细胞生长受到培养基中细胞浓度的限制 ,
易于扩大规模培养
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包括原代细胞在内的大多数细胞类型
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适应悬浮培养的细胞和其他一些无粘附性的细胞(如造血细胞)
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需要定期传代 ,
但易于在倒置显微镜下进行目视检验
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较易传代但需要每天进行细胞计数和存活率测定
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可连续收获产物 ,
用于细胞学研究等多种研究应用
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可在未经组织培养处理的培养容器中进行培养 ,
需要搅动以便进行充分气体交换
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总 结 : 细胞的后续实验往往决定了细胞培养的形式和培养基,除了经过标准组织培养处理和未经处理的表面外,还使用了其他表面改良技术来获得预期的细胞培养结果。