中文名称: Flag抗体亲和凝胶
英文名称:Anti-Flag Affinity gel
相关类别:抗体相关支持试剂
储 存:冷藏(2-8℃) 不可冻存
概 述:Flag抗体亲和凝胶是以小鼠抗Flag单克隆抗体和高交联度的琼脂糖凝胶结合而成,杂蛋白非特异性结合少,可用于Flag标签融合蛋白的纯化和免疫沉淀。
特 点:φ45-165 μm,1ml凝胶最少可结合1mg Flag标签蛋白
应 用:
纯化,免疫沉淀
Flag抗体亲和凝胶使用说明:
1. 纯化
1.1 填料准备:取适量的凝胶加入层析柱中,流干保存液,加入5倍柱体积(凝胶体积)的平衡液清洗。
1.2 加入样品溶液,室温震荡孵育30分钟(不能用磁力搅拌器搅拌),确保填料与样品溶液充分混合。1.3 孵育完毕后,将填料混合液离心:1000g,5分钟,或过滤收集填料。
1.4 将填料装入层析柱中,用平衡液清洗4-5次,直至紫外检测值稳定。
1.5 洗脱
1.5.1 酸性洗脱:加入5倍柱体积的酸性洗脱液,收集管中预先加好中和液20 μl中和液/ml洗脱液,分管收集。 注意:酸性洗脱后填料要立即用平衡液平衡,Anti-flag Affinity gel在洗脱液中不要超过20分钟。
1.5.2 竞争性洗脱:使用5倍柱体积的竞争性洗脱液flag多肽0.5 mg/ml洗脱,30℃孵育10-15分钟,重复1-2次,分管收集。
1.6 使用3倍柱体积的酸性洗脱液再生凝胶,然后用平衡液平衡至中性。 1.7 加入保存液,2-8℃保存。
2. 免疫沉淀 2.1 取20-100μl的Anti-flag Affinity gel加入到2ml 离心管中,离心:5000g,30秒,弃去上清。
2.2 加入0.5ml平衡液,悬浮填料,离心:5000g,30秒,弃去上清。重复一次。
2.3 加入200-1000μl样品裂解液,与填料混合均匀,置于旋转混合仪上轻轻旋转离心管,使样品和填料充分接触并吸附,室温1小时。混匀后离心:5000g,30秒,吸取上清,留样检测。
2.4 洗涤:加入0.5ml的洗涤液,悬浮填料,进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,离心:5000g,30秒,弃去上清。重复3次。
2.5 变性洗脱:加入5μl 5X变性洗脱液,沸水浴煮沸5分钟。离心:5000g,30秒,吸取上清进行SDS-PAGE电泳检测。
注意:变性洗脱液中含有SDS,会使偶联的Flag抗体变性,洗脱后的凝胶不可重复使用。
产品标签
用户评论(共6条评论)
- ADAM17抗原(重组蛋白)
- ARL8A抗原(重组蛋白)
- AP2S1抗原(重组蛋白)
- AKR1B10抗原(重组蛋白)
- ANGPTL4抗原(重组蛋白)
- ADAM7抗原(重组蛋白)
- ALKBH2抗原(重组蛋白)
- AURKAIP1抗原(重组蛋白)
- BCAS2抗原(重组蛋白)
- ATOX1抗原(重组蛋白)
- ANXA2抗原(重组蛋白)
- ATP6V1E2抗原(重组蛋白)
- ANAPC13抗原(重组蛋白)
- ADAP1抗原(重组蛋白)
- APIP抗原(重组蛋白)
- APOC1抗原(重组蛋白)
- ACBD4抗原(重组蛋白)
- ANGPT1抗原(重组蛋白)
- ACAD10抗原(重组蛋白)
- B2M抗原(重组蛋白)
- ADD1抗原(重组蛋白)
- A4GALT 抗原(重组蛋白)
- ANP32A抗原(重组蛋白)
- ATP6V0D1抗原(重组蛋白)
- ARL11抗原(重组蛋白)
- ARL6抗原(重组蛋白)
- ASPA抗原(重组蛋白)
- ABCC6抗原(重组蛋白)
- ANAPC10抗原(重组蛋白)
- ACMSD抗原(重组蛋白)
- BID抗原(重组蛋白)
- ASB9抗原(重组蛋白)
- ACP3抗原(重组蛋白)
- ATG12抗原(重组蛋白)
- ALKBH8抗原(重组蛋白)
- AKAP9抗原(重组蛋白)
- ACOT2抗原(重组蛋白)
- ANXA1抗原(重组蛋白)
- BCL10抗原(重组蛋白)
- AKR1D1抗原(重组蛋白)
- AKR1B1抗原(重组蛋白)
- ANXA10抗原(重组蛋白)
- ASF1A抗原(重组蛋白)
- AASDHPPT抗原(重组蛋白)
- ATG5抗原(重组蛋白)
- AIF1抗原(重组蛋白)
- ACTG1抗原(重组蛋白)
- ARHGDIA抗原(重组蛋白)
- BOLL抗原(重组蛋白)
- ACOT8抗原(重组蛋白)
- ACVR1B抗原(重组蛋白)
- ACY3抗原(重组蛋白)
- BIRC7抗原(重组蛋白)
- ARMC10抗原(重组蛋白)
- ARF4抗原(重组蛋白)
- ARL2抗原(重组蛋白)
- ANKRD1抗原(重组蛋白)
- ARF6抗原(重组蛋白)
- ACSBG2抗原(重组蛋白)
- AGER抗原(重组蛋白)
上海酶联生物科技有限公司
Shanghai Enzyme-linked Biotechnology Co., Ltd.
订购热线:4008-898-798 / 021-54720761
传 真:021-54222852
地址:上海市松江区云凯路66号T2楼1603室
酶联官方手机二维码
微信扫描二维码,参与酶联活动,
劲爆优惠触手可得!
本网站销售的所有产品仅用于工业应用或者科学研究等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。