人鼻黏膜上皮细胞
产品简介:
产品名称 : 人鼻黏膜上皮细胞
产品品牌 : 酶联生物
组织来源 : 鼻黏膜组织
产品规格 : 5×105cells/T 25细胞培养瓶
细胞简介:
人鼻黏膜上皮细胞分离自鼻黏膜组织;黏膜是覆盖在人体内消化、呼吸、泌尿、生殖等器官管腔内壁的一层组织结构,由上皮组织和疏松结缔组织构成。根据部位不同,有口腔黏膜、胃肠黏膜、鼻腔黏膜、气管黏膜、阴道黏膜、眼睑黏膜等不同名称。它们的结构也因功能、部位不一而不尽相同。鼻腔黏膜,简称鼻黏膜,覆盖于鼻腔表面,黏膜下方为软骨、骨或骨骼肌。根据结构与功能的不同,鼻黏膜又分为前庭部、呼吸部和嗅部三部分。
前庭部是邻近外鼻孔的部分,有丰富的鼻毛可以阻挡空气中较大的尘粒吸入。呼吸部占鼻黏膜的大部,有发达的上皮纤毛,它们可向咽部摆动,黏着有尘粒、细菌的黏液排向咽部,最终将它们排出体外。此外,此部分有丰富的血管与腺体,对吸入的空气有加温和湿润作用。嗅部黏膜范围较小,主要位于鼻腔顶部。它含有一种专司嗅觉的嗅细胞及嗅腺,它们分泌能溶解到达嗅区的含气味的微粒,刺激嗅细胞表面上的嗅毛产生嗅觉,而且还由于嗅细胞具有不同的受体,可分别接受不同化学分子的刺激,因此可产生不同的嗅觉。
方法简介:
酶联生物实验室分离的人鼻黏膜上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测:
酶联生物实验室分离的人鼻黏膜上皮细胞经C ytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培 养 基 : 含FBS、EG F、H ydrocortisone、肾上腺素、甲状腺素、Insulin、T ransf errin、Selenium Solution、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 : 每2-3天换液一次
生长特性 : 贴壁
细胞形态 : 上皮细胞样
传代特性 : 可传1-2代左右
传代比例 : 1:2
消 化 液 : 0. 25% 胰蛋白酶
培养条件 : 气相 : 空气,95% 。C O2,5%
人鼻黏膜上皮细胞体外培养周期有限。建议使用酶联生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养状态:
发货时发送细胞电子版照片
使用方法:
人鼻黏膜上皮细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈上皮细胞样,在酶联生物技术部标准操作流程下,细胞可传1-2代左右;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
1. 取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0. 1m g/m l),明胶(0. 1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项:
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和酶联生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。