基本信息
细胞编号 :ml-CC2193
细胞品牌 :酶联生物
细胞简介 :Luciferase U-937细胞稳定表达萤火虫荧光素酶。该细胞株性状稳定,培养时不需要添加抗生素维持。可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照,也可用于活体动物成像实验。U937-LUC细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。U-937细胞是由Sundstrom和Nilsson于1974年建立,取材于患组织细胞淋巴瘤病人的胸水。
研究表明:U-937细胞能被人混合淋巴细胞培养上清,佛波脂、维生素D3、γ干扰素、肿瘤坏死因子和维甲酸诱导终末单核细胞分化。U-937细胞免疫球蛋白产物和EB病毒表达为阴性;U-937细胞表达Fas抗原且对TNF和抗-Fas抗体敏感。
细胞规格 :1x10⁶cells/T25培养瓶或者1mL冻存管
种属来源 :人
组织来源 :组织细胞淋巴瘤
细胞形态 :悬浮生长
puro药筛浓度 :U937-LUC细胞puro药筛浓度为0.5ug/ml,培养过程中可不用再添加puro,如若担心抗性随着传代时间降低,可定期用0.2ug/ml浓度puro维持
生物安全等 :1
生长特性 :单核细胞
培养条件 :气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
保藏机构 :ATCC; CRL-1593 ATCC; CRL-1593.2 DSMZ; ACC-5 ECACC; 85011440
培 养 基 :RPMI-1640+10% FBS+1% PS
冻存条件 :无血清冻存液,液氮储存
细胞货期 :2周左右
发货方式 :复苏发货(T25瓶免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用)
供应范围 :仅限于科研实验使用,不可用于其它用途
细胞培养操作
T25瓶
收货处理 :
观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态
传代密度 :
细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养
传代比例 :
首次传代建议1:2传代,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
传代方法 :
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,弃去消化液,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
c、按6-8 mL/瓶补加培养基,轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心4 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
注意事项 :
1. 运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。
2. 因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。
冻存管
收货处理 :
到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏
传代密度 :
第二天换液并检查细胞密度
传代比例 :
一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶
传代方法 :
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8mL培养基,培养过夜)第二天换液并检查细胞密度。
注意事项 :
1. 收货时若发现干冰化完,检查冻存管是否融化,若已融化需直接离心细胞接种观察,若未融化可以将细胞按正常步骤保存。
2. 为保证细胞的高存活率,收到产品后,请立即解冻复苏细胞。
细胞冻存操作
冻存液配方 :
无血清冻存液,液氮储存
细胞密度 :
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例
冻存方法 :
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,加 1 mL血清重悬细胞,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5x10⁶~1x10⁷/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项 :
冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案
售后服务
细胞予重发
1. 细胞运输中遭遇的各种问题,细胞丢失瓶身破损、培养液严重漏液等,重发。
2. 收到细胞未开封,如出现污染状况,重发。
3. 收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发。
4. 常温发货的细胞静置2小时后,干冰冻存发货的细胞复苏2天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发。
5. 常温发货的细胞静置22小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后,出现污染,经核实后,重发。
6. 细胞活性问题,请在收到产品3天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发。
细胞不重发
1. 客户操作造成细胞污染,不重发。
2. 客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发。
3. 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发。
4. 细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片,不重发。
5. 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发。
6. 收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发。
特别说明
客户买细胞就找
上海酶联生物,稳定传代,无污染,包存活,提供整体课题外包服务,光学成像,流式实验,电镜实验,动物实验,病理实验,分子生物学实验,细胞实验等,严格把控产品质量,所有细胞产品均有细胞鉴别、无菌检查、支原体检查,为科研人员提供可靠放心的产品。