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CNE2-LUC/人鼻咽癌细胞-荧光素酶标记(STR鉴定正确)主图

CNE2-LUC/人鼻咽癌细胞-荧光素酶标记(STR鉴定正确)

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  • 货 号:ml-CC2211
  • 1x10⁶cells/T25或1mL冻存管
    规 格:
    ¥3000.00元
    价 格:
  • 快速询价     QQ:2881505708 免费咨询电话:021-54461587 / 021-54461730
    【友情提示】:产品价格与说明书请点击上面的链接,在线询价,索要说明书;
  • 重要提示:因产品不断更新,官网说明书如与纸质版有出入,请以纸质版为准! 购买前请务必让业务员单独给一份最新电子版说明书!
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基本信息
 

细胞编号 :ml-CC2211

细胞品牌 :酶联生物

细胞简介 :Luciferase CNE2细胞稳定表达萤火虫荧光素酶。该细胞株性状稳定,培养时不需要添加抗生素维持。可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照,也可用于活体动物成像实验。该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。  
 
细胞规格 :1x10⁶cells/T25培养瓶或者1mL冻存管

种属来源 :人

组织来源 :鼻

细胞形态 :上皮细胞样

puro药筛浓度 :CNE2-LUC细胞puro药筛浓度为1.0ug/ml,培养过程中可不用再添加puro,如若担心抗性随着传代时间降低,可定期用0.5ug/ml浓度puro维持

细胞代数 :10代以内

生物安全等 :1

生长特性 :贴壁生长

培养条件 :气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃

培 养 基 :90% DMEM+10% FBS+PS

冻存条件 :无血清冻存液,液氮储存

细胞货期 :现货,1周左右

发货方式 :复苏发货(T25瓶免运输费用)/  冻存发货(需加干冰运输费用)

供应范围 :仅限于科研实验使用,不可用于其它用途

细胞培养操作

T25瓶

收货处理 : 
观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态

传代密度 : 
细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养

传代比例 : 
首次传代建议1:2传代,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿

传代方法 : 
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。          
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,弃去消化液,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。          
c、按6-8 mL/瓶补加培养基,轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心4 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。          
d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。 

注意事项 : 
1. 运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。
2. 因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。

冻存管
 
收货处理 :
到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏

传代密度 :
第二天换液并检查细胞密度

传代比例 :
一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶

传代方法 :
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8mL培养基,培养过夜)第二天换液并检查细胞密度。

注意事项 :
1. 收货时若发现干冰化完,检查冻存管是否融化,若已融化需直接离心细胞接种观察,若未融化可以将细胞按正常步骤保存。
2. 为保证细胞的高存活率,收到产品后,请立即解冻复苏细胞。

细胞冻存操作

冻存液配方 :
无血清冻存液,液氮储存

细胞密度 :
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例

冻存方法 :
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,加 1 mL血清重悬细胞,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5x10⁶~1x10⁷/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

注意事项 :
冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

售后服务
细胞予重发
1. 细胞运输中遭遇的各种问题,细胞丢失瓶身破损、培养液严重漏液等,重发。
2. 收到细胞未开封,如出现污染状况,重发。
3. 收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发。
4. 常温发货的细胞静置2小时后,干冰冻存发货的细胞复苏2天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发。
5. 常温发货的细胞静置22小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后,出现污染,经核实后,重发。
6. 细胞活性问题,请在收到产品3天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发。

细胞不重发
1. 客户操作造成细胞污染,不重发。
2. 客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发。
3. 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发。
4. 细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片,不重发。
5. 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发。
6. 收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发。

特别说明
客户买细胞就找上海酶联生物,稳定传代,无污染,包存活,提供整体课题外包服务,光学成像,流式实验,电镜实验,动物实验,病理实验,分子生物学实验,细胞实验等,严格把控产品质量,所有细胞产品均有细胞鉴别、无菌检查、支原体检查,为科研人员提供可靠放心的产品。

用户评论(共6条评论)

  • 办事效率蛮高,几天,就帮我搞定了这个试剂盒,谢谢!
  • 盒子蛮不错,包含所需试剂,并提供了中英文双版说明书及增值税发票,很正规,销售人员的态度也谦和。
  • 灵敏度不错,重复性也行,试剂盒在我做的这些实验中,与国内同行的盒子相比来说,性价比挺高的,尤其是价格占有不错的优势,赞一个!
  • 操作挺方便的,也简单,当然,这也多亏了公司的技术人员详细的实验指导,很好,谢谢,实验也相当成功。
  • 实验出来的标准曲线很不错(很优美),而且价格相对合理,技术指导很到位......
  • 我购买了两盒,批次最新,保质期内,实验结果做出来了,货到的挺快,那么远,几天就到了,加上我做实验,一共五天就搞定了。
  • 经朋友介绍,购买了此公司的ELISA试剂盒,用过,还不错,实验效果很好,基本达到实验参数要求,如果,下次还做实验的话,我还买这家的,朋友这几年都在用这家的(长期订货)。

酶联生物经过不断的实验优化和改进,积累了大量的经验,拥有专业的酶联研发团队。利用专业的酶联免疫技术自主研发的elisa试剂盒,能对血清及其它样本定量检测抗原,定性检测特异性抗体。优质的试剂,先进的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA检测的方便性、稳定性、重复性和可靠性方面都具有很大的优势。

ELISA检测技术服务内容:
1、双抗体夹心法检测抗原 2、间接法检测抗体 3、为客户提供各种ELISA技术进行样本检测。

以上代测费,凡购买本公司试剂盒,我们免费代测!
凡购买本公司目录任何一种酶联免疫检测试剂盒,您只需将需要检测的动物(Human, Rat, Mouse, Rabbit, Monkey, Pig……)种类和检测指标(白介素类、激素类)及标本数量(48T/96T)通知公司业务员即可。在接到客户标本当日起,现货产品一周内将检测报告交到客户手中!
欢迎各科研单位在各种项目上与我们公司开展不同层次的密切合作,以双赢求发展,共同进步,为中国检测事业的发展积累经验。

二、样本要求
在收集标本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测,对收集后当天就进行检测的标本,及时储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,请造模取材后,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差,蛋白极易降解,直接影响实验质量,所以避免反复冻融。代测放免标本的客户取材前须向我司销售人员索要说明书,具体操作注意事项请与我司技术人员沟通。

液体类标本:标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。

血清:室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。

血浆:应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,加入10%(v/v)抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1%heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。

尿液、胸腹水、脑脊液:用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。

细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.0-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清置于-20度或-70度保存,如有必要,可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

三、寄标本时需注明以下情况:
1、标本编号;2、所测项目;3、是否做复孔;3、联系方式;4、实验后标本是否寄回。

客户须知:
客户应对所提供的材料及信息负责,如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。

贴壁培养与悬浮培养选哪个?

胞培养的优势在于能够控制细胞繁殖的物理化学环境( 即温度、 pH值、渗透压、O2和CO2张力 )和生理环境(即激素和营养浓度 )。除温度外,培养环境由生长培养基控制。虽然细胞培养的生理环境不如其物理化学环境明确,但是通过更好地了解血清成分、确定增殖所需的生长因子以及更好地了解培养过程中的细胞微环境(即细胞间相互作用、气体扩散、细胞 -基质相互作用),现在 酶联生物可以采用无血清培养基进行一些细胞系的培养。

 

 

目前主要有两种基本的细胞培养体系

 

1. 一种是使细胞在人工基质上单层生长贴壁培养)。

2. 一种是使细胞在培养基中自由漂浮生长(悬浮培养)。

 

贴壁培养

 

来自脊椎动物的大多数细胞,除了造血细胞系和少数其他细胞系,都是贴壁依赖性的,必须在经过专门处理以允许细胞粘附和扩散的合适基质上培养。

 

悬浮培养

 

但许多细胞系也可采用悬浮培养。大多数市售昆虫细胞系在单层或悬浮培养物中生长良好。悬浮培养细胞可在未经组织培养处理的培养瓶中培养,但随着培养物体积与表面积之比(通常为 0.2-0.5mL/cm2)的增加,阻碍了气体的充分交换,因此需要对培养基进行搅拌。这种搅拌 一般通过磁力搅拌器或者旋转瓶实现

 

 

以下是贴壁培养与悬浮培养两种培养方式在适用类型,传代方式,采用酶法,细胞生长,培养方法,实验结果方面的详细对比。

 

贴壁培养

悬浮培养

需要使用经过组织培养处理的容器

无需通过酶法或机械方法解离细胞

细胞生长受到表面积限制 , 从而可能限制细胞产量

细胞生长受到培养基中细胞浓度的限制 , 易于扩大规模培养

包括原代细胞在内的大多数细胞类型

适应悬浮培养的细胞和其他一些无粘附性的细胞(如造血细胞)

需要定期传代 , 但易于在倒置显微镜下进行目视检验

较易传代但需要每天进行细胞计数和存活率测定

可连续收获产物 , 用于细胞学研究等多种研究应用

可在未经组织培养处理的培养容器中进行培养 , 需要搅动以便进行充分气体交换

 

  : 细胞的后续实验往往决定了细胞培养的形式和培养基,除了经过标准组织培养处理和未经处理的表面外,还使用了其他表面改良技术来获得预期的细胞培养结果。

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