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<u><strong><span style="font-size: medium;"><a href="http://www.mlbio.cn/category-358-b0.html"><span style="color: rgb(255, 0, 0);">人直肠癌组织源细胞</span></a></span></strong></u></p>
<p><u><strong>产品简介</strong></u>：</p>
<p>产品名称 ：人直肠癌组织源细胞</p>
<p>产品品牌 ：酶联生物</p>
<p>组织来源 ：直肠癌组织</p>
<p>产品规格 ：5×105cells/T 25细胞培养瓶</p>
<p><strong><u>细胞简介</u></strong>：</p>
<p>人直肠癌组织源细胞分离自癌组织。癌(can cer) 是指起源于上皮组织的恶性肿瘤，是恶性肿瘤中最常见的一类。相对应的，起源于间叶组织的恶性肿瘤统称为肉瘤。有少数恶性肿瘤不按上述原则命名，如肾母细胞瘤、恶性畸胎瘤等。一般人们所说的“癌症”习惯上泛指所有恶性肿瘤。癌症具有细胞分化和增殖异常、生长失去控制、浸润性和转移性等生物学特征，其发生是一个多因子、多步骤的复杂过程，分为致癌、促癌、演进三个过程，与吸烟、感染、职业暴露、环境污染、不合理膳食、遗传因素密切相关。癌细胞，是一种变异的细胞，是产生癌症的病源。</p>
<p>癌细胞与正常细胞不同，有无限增殖、可转化和易转移三大特点，能够无限增殖并破坏正常的细胞组织。癌细胞除了分裂失控外(能进行多极分裂) ，还会局部侵入周围正常组织甚至经由体内循环系统或淋巴系统转移到身体其他部分。分恶性和良性两种。</p>
<p><u><strong>方法简介</strong></u>：</p>
<p>酶联生物实验室分离的癌组织源细胞采用胶原酶消化、经Percoll离心纯化制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。</p>
<p><u><strong>质量检测</strong></u>：</p>
<p>酶联生物实验室分离的人直肠癌组织源细胞经检测，纯度可达90% 以上，且不含有H IV-1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。</p>
<p><u><strong>培养信息</strong></u>：</p>
<p>培 养 基 ：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等</p>
<p>换液频率 ：每2-3天换液一次</p>
<p>生长特性 ：贴壁 </p>
<p>细胞形态 ：梭形、多角形</p>
<p>传代特性 ：可传5代左右。3代以内状态最佳</p>
<p>传代比例 ：1:2</p>
<p>消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白酶</p>
<p>培养条件 ：气相 ：空气，95% 。C O2，5%</p>
<p>人直肠癌组织源细胞体外培养周期有限。建议使用酶联生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。</p>
<p><u><strong>细胞培养状态</strong></u>：</p>
<p>发货时发送细胞电子版照片</p>
<p><u><strong>使用方法</strong></u>：</p>
<p>人直肠癌组织源细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈梭形、多角形，在酶联生物技术部标准操作流程下，细胞可传5代左右。3代以内状态最佳。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。</p>
<p><u><strong>客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作</strong></u>：</p>
<p>1. 取出T 25细胞培养瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。</p>
<p>2. 贴壁细胞消化</p>
<p>1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次。</p>
<p>2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化。</p>
<p>3) 用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5m L，置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。</p>
<p>4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。</p>
<p>3. 细胞实验</p>
<p>因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0. 1m g/m l），明胶（0. 1% ），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。</p>
<p><u><strong>注意事项</strong></u>：</p>
<p>1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。</p>
<p>2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。</p>
<p>3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。</p>
<p>4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和酶联生物技术部沟通。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。</p>
用户评论(共6条评论)
酶联生物经过不断的实验优化和改进，积累了大量的经验，拥有专业的酶联研发团队。利用专业的酶联免疫技术自主研发的elisa试剂盒，能对血清及其它样本定量检测抗原，定性检测特异性抗体。优质的试剂，先进的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA检测的方便性、稳定性、重复性和可靠性方面都具有很大的优势。
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二、样本要求
在收集标本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测，对收集后当天就进行检测的标本，及时储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，请造模取材后，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差，蛋白极易降解，直接影响实验质量，所以避免反复冻融。代测放免标本的客户取材前须向我司销售人员索要说明书，具体操作注意事项请与我司技术人员沟通。
液体类标本：标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。
血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
血浆：应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入10%（v/v）抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1%heparin
或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
尿液、胸腹水、脑脊液：用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.0-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清置于-20度或-70度保存，如有必要，可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
三、寄标本时需注明以下情况：
1、标本编号；2、所测项目；3、是否做复孔；3、联系方式；4、实验后标本是否寄回。
客户须知：
客户应对所提供的材料及信息负责，如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。
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原代细胞培养问 题
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组织块直接培养法
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1.
取材，用
Hank's液洗涤三次，并剔除脂肪，结缔组织，血液等杂物。
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2.
用手术剪将组织剪切成
1mm3左右的小块，再用Hank's液洗三次。
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3. 将组织块转移至培养瓶，并贴附于瓶底面。
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4.
轻轻将培养瓶翻转，瓶底朝上，向瓶内注入适量的培养液，将培养瓶放置在
37℃恒温箱内培养。
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5.
放置待组织小块贴附后，将培养瓶慢慢翻转平放，使组织浸入培养液中
37℃继续培养。
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消化培养法
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1.
取材，用
Hank's液洗涤三次，并剔除脂肪，结缔组织，血液等杂物。
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2.
用手术剪将组织剪切成
1mm3左右的小块，再用Hank's液洗三次。
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3.
视组织块量加入酶液，
37℃中消化20—40分钟，每隔5分钟振荡一次，或用吸管吹打一次，使细胞分离。
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4.
加入
3—5ml培养液以终止酶消化作用（或加入相关酶抑制剂）。
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5.
静置
5—10分钟，使未分散的组织块下沉，取悬液加入到离心管中。
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6. 1000rpm，离心10分钟，弃上清液。
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7.
加入
Hank's液5ml，冲散细胞，再离心一次，弃上清液。
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8.
加入培养液
1—2ml（视细胞量），血球计数板计数。
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9.
将细胞转移到培养瓶中，
37℃下培养。
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器官培养法
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1.
将不锈网做成支架形状，调整其高度至培养皿的
1/2深度平面，在其表面放置0.5μm孔径滤膜。
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2. 将培养液加入培养皿中，使液面刚刚接触到滤膜，但不要使其浮起。
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3.
将要培养器官组织放在滤膜上，一般厚度不要超过
200μm，水平面积不超过10mm2。
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4.
将上述准备好的培养物放入
CO2培养箱，并加注氧气调整氧分压，建议到90%。
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5. 培养过程中要注意观察培养液平面，尽可能保持在与滤膜一致的水平上。
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6.
上述可进行器官培养
1-3周，每2-3天换液一次，并根据情况做进一步实验和检测。
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