基本信息
细胞品牌 : 酶联生物
种属来源 : 人
细胞编号 : ml-CC2040
组织来源 : 胰腺
生长特性 : 贴壁生长
细胞形态 : 多边形细胞样
细胞代数 : 10代以内
细胞规格 : 1x10⁶cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
培 养 基 : 80% IMDM+20% FBS+PS
培养条件 : 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
重要提醒 : 注:该细胞比较难消化,且消化后贴壁时间较长,因此传代处理后24-48h内尽量不要移动,防止影响贴壁,该细胞易聚团成斑块状生长,生长非常缓慢,属正常现象,保持营养充足即可。
培养瓶中的培养基是不含药物的,待细胞状态良好,稳定生长时,可以用含加含15nM的吉西他滨药物培养基处理48h,期间若有部分细胞悬浮起来,属于正常情况,通过换液去掉即可。冻存时请不要在培养基中加药物。
冻存条件 : 无血清冻存液,液氮储存
细胞货期 : 现货,1周左右
发货方式 : 复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用)
供应范围 : 仅限于科研实验使用,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明 : 具体操作步骤以随货产品说明书为主
细胞培养操作
T25瓶
收货处理 : 观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态
传代密度 : 细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养
传代比例 : 首次传代建议1:2传代,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
传代方法
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化2-5 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
注意事项
1.运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。
2.因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。
冻存管
收货处理 : 收到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏
传代密度 : 第二天换液并检查细胞密度
传代比例 : 一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶
传代方法 : 将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)第二天换液并检查细胞密度。
注意事项
1.收货时若发现干冰化完,检查冻存管是否融化,若已融化需直接离心细胞接种观察,若未融化可以将细胞按正常步骤保存。
2.为保证细胞的高存活率,收到产品后,请立即解冻复苏细胞。
细胞冻存操作
冻存液配方 : 无血清冻存液,液氮储存
细 胞 密 度 : 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。
下面T25瓶为例
冻存方法
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5x106~1x107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项
冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案
售后服务
细胞予重发
1. 细胞运输中遭遇的各种问题,细胞丢失瓶身破损、培养液严重漏液等,重发。
2. 收到细胞未开封,如出现污染状况,重发。
3. 收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发。
4. 常温发货的细胞静置2小时后,干冰冻存发货的细胞复苏2天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发。
5. 常温发货的细胞静置22小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后,出现污染,经核实后,重发。
6. 细胞活性问题,请在收到产品3天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发。
细胞不重发
1. 客户操作造成细胞污染,不重发。
2. 客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发。
3. 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发。
4. 细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片,不重发。
5. 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发。
6. 收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发。
特别说明
客户买细胞就找上海酶联生物,稳定传代,无污染,包存活,提供整体课题外包服务,光学成像,流式实验,电镜实验,动物实验,病理实验,分子生物学实验,细胞实验等,严格把控产品质量,所有细胞产品均有细胞鉴别、无菌检查、支原体检查,为科研人员提供可靠放心的产品。