基本信息
细胞编号 ：ml-CC2119
细胞品牌 ：酶联生物
细胞简介 ：Luciferase CNE2细胞稳定表达萤火虫荧光素酶。该细胞株性状稳定，培养时不需要添加抗生素维持。可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照，也可用于活体动物成像实验。CNE2-LUC-EGFP细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。
细胞规格 ：1x10⁶cells/T25培养瓶或者1mL冻存管
种属来源 ：人
组织来源 ：鼻
细胞形态 ：上皮细胞样
puro药筛浓度 ：CNE2-LUC-EGFP细胞puro药筛浓度为1.0ug/ml，培养过程中可不用再添加puro，如若担心抗性随着传代时间降低，可定期用0.5ug/ml浓度puro维持
支原体检测 ：无
生长特性 ：贴壁生长
培养条件 ：气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
培 养 基 ：90% DMEM+10% FBS+PS
冻存条件 ：无血清冻存液，液氮储存
细胞货期 ：现货，1周左右
发货方式 ：复苏发货（T25瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用）
供应范围 ：仅限于科研实验使用，不可用于其它用途
细胞培养操作
Ｔ25瓶
收货处理 ：
观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁，将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h，以便稳定细胞状态
传代密度 ：
细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养
传代比例 ：
首次传代建议1：2传代，1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
传代方法 ：
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗CNE2-LUC-EGFP细胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有CNE2-LUC-EGFP细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min（视细胞消化情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若CNE2-LUC-EGFP细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
c、将CNE2-LUC-EGFP细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
注意事项 ：
1. 运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。
2. 因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。
冻存管
收货处理 ：
到细胞后，需立即转入液氮冻存或直接复苏
传代密度 ：
第二天换液并检查细胞密度
传代比例 ：
一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶
传代方法 ：
将含有1 mL CNE2-LUC-EGFP细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL完全培养基，培养过夜）。第三天换液并检查CNE2-LUC-EGFP细胞密度。
注意事项 ：
1. 收货时若发现干冰化完，检查冻存管是否融化，若已融化需直接离心细胞接种观察，若未融化可以将细胞按正常步骤保存。
2. 为保证细胞的高存活率，收到产品后，请立即解冻复苏细胞。
细胞冻存操作
冻存液配方 ：
无血清冻存液，液氮储存
细胞密度 ：
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例
冻存方法 ：
a、收集CNE2-LUC-EGFP细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，加 1 mL血清重悬细胞，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使CNE2-LUC-EGFP细胞密度5x106~1x107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项 ：
冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案
售后服务
细胞予重发
1. 细胞运输中遭遇的各种问题，细胞丢失瓶身破损、培养液严重漏液等，重发。
2. 收到细胞未开封，如出现污染状况，重发。
3. 收到细胞3天内，发现污染问题，经核实后，重发。
4. 常温发货的细胞静置2小时后，干冰冻存发货的细胞复苏2天后，绝大多数细胞未存活，经核实后，重发。
5. 常温发货的细胞静置22小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后，出现污染，经核实后，重发。
6. 细胞活性问题，请在收到产品3天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，经核实后，重发。
细胞不重发
1. 客户操作造成细胞污染，不重发。
2. 客户严重操作失误致细胞状态不好，不重发。
3. 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发。
4. 细胞状态不好，未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片，不重发。
5. 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的，不重发。
6. 收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的，不重发。
特别说明
客户买细胞就找
上海酶联生物，稳定传代，无污染，包存活，提供整体课题外包服务，光学成像，流式实验，电镜实验，动物实验，病理实验，分子生物学实验，细胞实验等，严格把控产品质量，所有细胞产品均有细胞鉴别、无菌检查、支原体检查，为科研人员提供可靠放心的产品。
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